Análise in-silico de dois antígenos estruturais e do anticorpo 4B8 para o diagnóstico diferencial de Orthoflavivirus zikaense.

Abstract

A febre Zika é uma arbovirose causada pelo Orthoflavivirus zikaense (ZIKV), associada a complicações neurológicas e congênitas. O diagnóstico diferencial é dificultado pela sobreposição das manifestações clínicas entre as infecções por Orthoflavivirus e pela elevada similaridade estrutural e antigênica da proteína não estrutural 1 (NS1) entre ZIKV, dengue vírus (DENV) e o vírus da febre amarela (YFV), levando a ocorrência de reações cruzadas em testes sorológicos. Nesse contexto, a proteína NS1 destaca-se como biomarcador promissor para diagnóstico específico, devido à presença de regiões antigênicas capazes de reconhecimento imunológico. Este estudo teve como objetivo caracterizar estruturalmente proteínas recombinantes putativas derivadas de epítopos da NS1 do ZIKV e explorar, por meio de ferramentas bioinformáticas, seu potencial teórico para futura aplicação diagnóstica. Foram selecionados dois epítopos descritos na literatura, denominados E e F, utilizados na construção das proteínas recombinantes PRE e PRF. As sequências foram submetidas à modelagem tridimensional e análise de propriedades físico-químicas, com foco em hidrofobicidade e acessibilidade superficial. Em seguida, realizou-se o mapeamento dos resíduos críticos envolvidos no reconhecimento do anticorpo monoclonal 4B8, bem como a modelagem do fragmento variável de cadeia única (scFv). A interação entre as proteínas recombinantes e o anticorpo foi avaliada por docking molecular no servidor HADDOCK, complementada pela análise de interfaces e interações intermoleculares pelo PLIP. Os resultados indicaram que a PRE apresentou maior compatibilidade estrutural com o padrão de reconhecimento do anticorpo 4B8, preservando resíduos críticos e essenciais, além de maior área de superfície encoberta (2023,28 Ų), menor número de violações de restrições (14) e interface mais extensa em comparação à PRF. Além disso, as análises mostraram maior especificidade do complexo PRE–scFv 4B8, sustentada por ligações de hidrogênio. A PRF apresentou, entre outras análises, ausência de resíduos essenciais e menor compatibilidade estrutural com o padrão de reconhecimento da NS1 nativa. Conclui-se que a PRE apresenta maior potencial para aplicações em testes sorológicos destinados ao diagnóstico diferencial do ZIKV. O estudo reforça a relevância das ferramentas bioinformáticas na identificação de moléculas com potencial diagnóstico, contribuindo para estratégias mais específicas e sensíveis no contexto das arboviroses.